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土壤過氧化物酶(S-POD)活性檢測試劑盒(分光光度法)
更新時間:2023-02-23瀏覽:772次

  土壤過氧化物酶(S-POD)活性檢測試劑盒(分光光度法)

  中文名稱:土壤過氧化物酶(S-POD)活性檢測試劑盒

  儲存條件:2-8℃

  單位:盒

  有效期:6個月

  英文名稱:Soil Peroxidase(S-POD)Activity Assay Kit

  檢測方法:可見分光光度法 Spectrophotometer

  規(guī)格:50T/24S

  測定意義:S-POD 主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。

  測定原理:S-POD 催化有機物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm 有特征光吸收。

  自備用品:可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、ym100mL(不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。

  備注:

  以上數(shù)據(jù)均來自公開文獻,暫未進行獨立驗證, 僅供參考。

  產(chǎn)品組成:使用前請認(rèn)真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致,有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

  試劑名稱 規(guī)格 保存條件

  試劑一 粉劑×2 瓶 2-8°C保存

  試劑二 液體 5 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑三 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存

  試劑四 液體 100 mL×1 瓶(自備) 2-8°C保存

  標(biāo)準(zhǔn)品 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存

  溶液的配制:

  1、 試劑一:臨用前加入 10 mL 蒸餾水,用不完的試劑 2-8°C保存一周;

  2、 試劑四:自備ym;

  3、 標(biāo)準(zhǔn)品:相當(dāng)于每 1mL ym相中含有 0.2mg/mL 紫色沒食子素。

  產(chǎn)品說明:

  S-POD主要來源于土壤微生物,能夠氧化土壤有機物質(zhì)產(chǎn)生過氧化物,在腐殖質(zhì)的形成過程中具有重要作用。

  S-POD催化有機物質(zhì)氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。

  Soil organic matter Quinone (430nm)

  注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

  需自備的儀器和用品:

  可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液器、0.5mol/L HCl溶液、1mL玻璃比色皿、30-50目篩、ym不允許快遞)、研缽、冰和蒸餾水。

  操作步驟:

  一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)

  新鮮土樣自然風(fēng)干或 37°C烘箱風(fēng)干,過 30-50 目篩。

  二、測定步驟

  1、 標(biāo)準(zhǔn)品處理:將標(biāo)準(zhǔn)品用0.5mol/L HCl溶液稀釋至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL,可參考下表。

  序號 稀釋前濃度(mg/mL) 標(biāo)準(zhǔn)液體積(μL) 0.5 mol/L HCl 體積(μL) 稀釋后濃度(mg/mL)

  1 0.2 500 500 0.1

  2 0.2 400 600 0.08

  3 0.2 300 700 0.06

  4 0.2 200 800 0.04

  5 0.2 100 900 0.02

  6 0.2 50 950 0.01

  7 - - 1000 0

  備注:試驗中每個標(biāo)準(zhǔn)管需 1000μL 標(biāo)準(zhǔn)溶液。

  2、 標(biāo)曲測定:分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至430nm,0mg/mL管調(diào)零,直接測定稀釋后各標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)。

  3、 樣本測定:

  試劑名稱 測定管 對照管

  風(fēng)干土樣(g) 0.05 0.05

  蒸餾水 - 100

  試劑一(μL) 400 400

  試劑二(μL) 100 -

  震蕩混勻,置于30°C水浴鍋準(zhǔn)確反應(yīng)1 h

  試劑三(μL) 200 200

  試劑四(μL) 1750 1750

  振蕩數(shù)次,室溫靜置30min,用試劑四調(diào)零,取1mL上層液于430nm處測定吸光值A(chǔ),記為A測定管、A對照管。

  計算ΔA測定=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。

  三、S-POD 活力計算

  1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

  根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管的濃度(y,mg/mL)和吸光度A標(biāo)準(zhǔn)(x,A標(biāo)準(zhǔn)),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,將ΔA測定(x)帶入公式計算測定中樣本的濃度y值(mg/mL)。

  2、S-POD活力計算

  單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1mg紫色沒食子素定義為一個酶活力單位。

  S-POD活力(U/g 土樣)=y×V提取相÷W÷T=840×y

  T:反應(yīng)時間,1h=1/24d;V提取相:提取相總體積,1.75mL;W:樣本質(zhì)量,0.05g。

  注意事項:

  每個樣本均需做對照管。

  相關(guān)系列產(chǎn)品:

  BC0110/BC0115 土壤多酚氧化酶(S-PPO)活性檢測試劑盒

  土壤過氧化物酶(S-POD) 活性檢測試劑盒本生生物公司供應(yīng):熒光定量PCR耗材,細(xì)胞培養(yǎng)類,核酸提取耗材,試劑包裝類,生物試劑,色素,原料,抗原抗體,試劑盒等,通用耗材包括深孔板、96孔硅膠墊、吸頭、封板膜、玻片、試管、量杯、試劑槽、離心管、移液器等。


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