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BUNSEN本生:ELISA試劑實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)盤點(diǎn)
更新時(shí)間:2023-08-18瀏覽:714次

  BUNSEN本生:ELISA試劑實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)盤點(diǎn)


  ELISA試劑盒細(xì)節(jié)盤點(diǎn)

  1. 樣本收集

  每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測(cè)指標(biāo),如要做復(fù)孔,標(biāo)本量收集體積=10Oul×檢測(cè)指標(biāo)×2。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20°℃或-70°℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20°℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。如需離心的樣本,離心轉(zhuǎn)速不宜過高(2000~3000)

  2. ELISA加樣

  加樣品時(shí),單孔用量要求: ≥50ul/指標(biāo),如需要做2個(gè)復(fù)孔則血量≥100ul/指標(biāo)。如果樣本量不充足,具體用量可咨詢您的專屬銷售。

  3. 樣品捕獲抗體孵育

  37C恒溫孵育,避免溫度變化過大


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  4. 洗滌

  機(jī)洗: 將25x×洗滌緩沖液稀釋成1×,1×洗滌緩沖液洗三次,每次加300uL浸泡60s手洗:手洗次數(shù)應(yīng)比機(jī)洗次數(shù)多,浸泡時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)延長

  手洗容易導(dǎo)致吸附在酶標(biāo)板底部的試劑脫落,從而導(dǎo)致結(jié)果偏小,手洗次數(shù)過多也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,建議機(jī)洗

  5. 底物顯色(TMB顯色) 孵育

  TMB在使用前應(yīng)放置室溫平衡30分鐘,加的量為A、B各50uL

  6. ELISA終止液終止反應(yīng)

  加完TMB終止液應(yīng)讓其混勻再在酶標(biāo)儀上讀數(shù)

  7. 酶標(biāo)儀讀數(shù)

  在450nm波長處測(cè)定O.D值

  8. 根據(jù)O.D值計(jì)算樣本濃度

  使用軟件擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合度(r或R2)以及殘差平方和(s)選擇合適的曲線。

  ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。

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