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人胃蛋白酶原I(PGI)ELISA試劑盒實驗使用說明書
BS-0087人胃蛋白酶原I(PGI)ELISA試劑盒
以下是關(guān)于人胃蛋白酶原I(PGI)ELISA試劑盒實驗使用說明書的綜合信息整理:
一、試劑盒組成
微孔板?:預(yù)包被高親和力單克隆抗人PGI抗體IgG1
液體組分?:濃縮洗滌液、稀釋液、空白液、標準液、對照液、酶標液、底物液(含TMB)、終止液(硫酸溶液)
附件?:封孔膜、說明書、密封袋等
二、檢測原理
采用雙抗體夾心法或酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)原理:
樣本中PGI與包被抗體結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物
加入HRP標記的二抗后顯色,顏色深淺與PGI濃度成正比
三、操作步驟(通用流程)
樣本準備?:血清/血漿需離心去除顆粒物,避免反復(fù)凍融
加樣與孵育?:
加入標準品、樣本至微孔板,37℃孵育30-60分鐘
洗滌?:使用洗滌液清洗未結(jié)合物質(zhì)(通常3-5次)
酶標反應(yīng)?:加入HRP標記抗體,再次孵育后洗滌
顯色與終止?:
加入TMB底物液,避光反應(yīng)10-15分鐘
加入終止液后立即測定OD450nm值
四、性能參數(shù)
指標 要求/范圍 來源
靈敏度 PGI檢測量10ng/ml
線性范圍 10-160ng/ml(r≥0.98)
精密度 批內(nèi)CV≤15%,批間CV≤20%
回收率 血清84-101%,血漿92-106%
五、注意事項
樣本處理?:EDTA或肝素抗凝血漿可用,避免溶血
儲存條件?:試劑盒2-8℃保存,有效期通常14個月
質(zhì)量控制?:每批次實驗需同時檢測標準品和對照品
六、結(jié)果計算
通過標準曲線(濃度-OD值)擬合計算樣本PGI含量,建議使用四參數(shù)邏輯曲線擬合
注:不同品牌試劑盒可能存在差異,請以實際說明書為準。操作時需穿戴防護裝備,避免直接接觸終止液等腐蝕性試劑。
以上資料僅供參考,具體請咨詢技術(shù)老師及供應(yīng)商。
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